Fullsjálfvirk kjarnsýruútdráttar- og greiningarvél New Tech

Fimm styrkir:
● Tæki stillt með kjarnsýruútdrætti og hreinsaða þrepi
● Tækið stillt með ultrasonic útdráttareiningu
● Tæki stillt með fullkomlega sjálfvirkum
● Tækið stillt með breytilegum hitamögnun
● Tækið stillt með fullkomlega lokuðu hvarfefnissetti

1. Þarf að draga út og hreinsa kjarnsýrugreiningarefni?
Meginreglan um greiningu kjarnsýra er sem hér segir: undir virkni primers er DNA pólýmerasi notaður til að framkvæma keðjuverkunarmögnun á sniðmáti DNA/RNA (sem krefst andstæða umritunar á NA), og síðan greinist magn flúrljómunarmerkis sem losnar til að ákvarða hvort sýnið inniheldur kjarnsýru (DNA/RNA) sýkingarinnar sem á að greina.

1) Sýni sem ekki hafa verið dregin út eða hreinsuð geta innihaldið marga þætti sem hafa áhrif á lokaniðurstöðuna: núkleasi (sem getur leyst upp markkjarnsýruna og valdið fölsku neikvæðu), próteasa (sem getur dregið úr DNA pólýmerasa og valdið fölsku neikvæðu), þungmálmi salt (sem leiðir til óvirkjunar á syntasa og veldur fölsku jákvætti), of súrt eða of basískt PH (sem getur valdið því að viðbrögðin mistekst), ófullnægjandi RNA (sem leiðir til rangrar neikvæðrar bakuppskriftarbilunar).

2) Erfitt er að magna upp sum sýni beint: Gram-jákvæð og sum sníkjudýr, vegna þykkra frumuveggja þeirra og annarra uppbyggingar, ef þau fara ekki í gegnum kjarnsýruútdrátt og hreinsunarferlið, gæti útdráttarlausa settið bilað fyrir slíkt. sýnishorn.

Þess vegna er mælt með því að velja prófunarbúnaðinn eða tækið sem er stillt með kjarnsýruútdráttarþrepinu.

2. Efnafræðileg útdráttur eða eðlisfræðileg ultrasonic sundrunarútdráttur?
Almennt séð er hægt að nota efnaútdrátt á flestar formeðferðir og hreinsun.Hins vegar, í þykkvegguðum Gram-jákvæðum bakteríum og sumum sníkjudýrum, er það líka þannig að efnafræðileg útdráttur getur ekki fengið árangursríkt kjarnsýrusniðmát, sem leiðir til rangrar neikvæðrar greiningar.Að auki notar efnaútdráttur oft sterk efni, ef skolunin er ekki ítarleg er auðvelt að koma sterkum basa inn í hvarfkerfið, sem leiðir til ónákvæmar niðurstöður.

Ultrasonic sundurliðun notar líkamlega mulning, sem hefur verið notað með góðum árangri af GeneXpert, leiðandi fyrirtæki á sviði POCT til notkunar fyrir menn, og hefur algera yfirburði við kjarnsýruútdrátt sumra flókinna sýna (eins og Mycobacterium tuberculosis).

Þess vegna er mælt með því að velja prófunarbúnað eða tæki sem er stillt með kjarnsýruútdráttarþrepi.og það er ákjósanlegt ef það er ultrasonic útdráttareining.

3. Handvirkt, hálfsjálfvirkt og fullsjálfvirkt?
Þetta er vandamál vegna launakostnaðar og vinnuhagkvæmni.Sem stendur eru gæludýrasjúkrahús án nægjanlegs starfsfólks, og kjarnsýruútdráttur og uppgötvun er vinna sem krefst ákveðinnar kunnáttu og reynslu.Það er enginn vafi á því að sjálfvirka kjarnsýruútdráttar- og greiningarvélin er hið fullkomna val.

4. Stöðug hitamögnun eða breytileg hitamögnun?
Mögnunarviðbrögðin eru kjarnsýrugreiningartengill og fagtæknin sem tengist þessum hlekk er flókin.Í grófum dráttum eru ensím notuð til að magna upp kjarnsýruna.Í mögnunarferlinu greinist magnaða flúrljómunarmerkið eða innfellda flúrljómunarmerkið.Almennt talað, því fyrr sem flúrljómunarmerkið birtist, því meira er markgenainnihald sýnisins.

Stöðug hitamögnun er kjarnsýrumögnun við föstu hitastig, en breytileg hitamögnun er hringlaga mögnun sem er stranglega í samræmi við denaturation-annealing-framlengingu.Stöðugur mögnunartími hitastigs hefur verið framkvæmdur, en breytilegur mögnunartími hitastigs hefur mikil áhrif á hraða hitastigshækkunar og -falls tækisins (sem stendur hafa margir framleiðendur getað gert 40 lotur af mögnun á um það bil 30 mínútum).

Ef rannsóknarstofuaðstæður eru góðar og svæðisskipulagið strangt er eðlilegt að segja að nákvæmnismunurinn á þessu tvennu verði ekki mikill.Hins vegar mun breytilegt hitastig mögnun mynda fleiri kjarnsýruafurðir á tiltölulega styttri tíma.Fyrir rannsóknarstofur án strangrar svæðisskipulags og fagmenntunarstarfsfólks verður hættan á kjarnsýru úðabrúsa meiri hættan, falskur jákvæður á sér stað þegar leki á sér stað og sem er mjög erfitt að útrýma.

Að auki er stöðugt hitastig mögnun einnig hætt við ósértækri mögnun þegar sýnishornið er flókið (hlutfallslegt hvarfhitastig er lægra og því hærra sem framlengingarhitastigið er, því betri er bindiefni grunnsins).

Hvað núverandi tækni varðar er breytilegt hitastig mögnun áreiðanlegri.

5. Hvernig á að forðast hættu á leka kjarnsýrumögnunarafurða?
Sem stendur velja margir framleiðendur kirtilgerðina PCR rör sem kjarnsýruviðbragðsrör, sem er innsiglað með núningi, og hitastigsdenaturnunin í breytilegri hitastigsbreytingu í breytilegu hitastigi PCR mögnun nær 90 gráðum
Celsíustig.Endurtekið ferli stækkunar með hita og samdrætti með kulda er mikil áskorun fyrir þéttingu PCR slöngunnar og tiltölulega auðvelt er að valda kirtilgerð PCR slöngunnar leka.

Æskilegt er að nota efnahvarfið með fullkomlega lokuðu setti/röri til að forðast leka efnahvarfsins.Það væri fullkomið ef hægt væri að útbúa fulllokað sett fyrir kjarnsýruútdrátt og greiningu.

Þannig að nýja fullsjálfvirka kjarnsýruútdráttar- og greiningarvél New Tech hefur ofangreinda fimm bestu valkosti.